反相填料是以硅胶为基质,表面键合极性较弱官能团的键合相,常用类型包括C18、C8、C4、苯基柱等,其核心原理是通过疏水相互作用实现分子分离,广泛应用于药物分析、生命科学及工业制备领域。
反相填料核心组成:
基质材料
以高纯度硅胶为基质,通过化学修饰(如键合烷基链、苯基等)形成疏水性表面。例如:
C18填料:键合18个碳原子的长链烷基,疏水性强,适用于非极性到中等极性化合物(如抗生素、类固醇)的分离。
C8填料:键合8个碳原子的短链烷基,疏水性较弱,保留能力低于C18,但分离速度更快,适合极性较大的化合物(如某些药物中间体)。
苯基柱:表面修饰苯基基团,对芳香化合物具有选择性,可通过π-π相互作用分离多环芳烃等。
分离机制
基于疏水相互作用:当样品分子进入色谱柱时,非极性部分与填料表面的烷基链结合,极性分子则随流动相(如水-甲醇混合液)优先洗脱。通过调节流动相中有机溶剂比例,可控制分子保留时间,实现精准分离。