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大孔吸附树脂的操作要点涵盖吸附、解吸、再生及安全防护等多个环节,需根据目标物质性质和树脂类型精细调控。一、吸附操作要点树脂预处理清洗:用乙醇浸泡树脂24小时,去除杂质和气泡,再用蒸馏水洗至无醇味。活化:根据树脂极性选择预处理方式:非极性树脂:用丙酮或甲醇浸泡后,水洗至中性。极性树脂:用酸(如5%HCl)或碱(如5%NaOH)交替浸泡,水洗至中性。上样液准备浓度控制:上样液浓度通常为0.1-1g/mL,浓度过高易导致树脂堵塞,过低则效率低。pH调节:根据目标物质极性调整pH值:...
凝胶过滤柱又称分子筛层析柱或尺寸排阻层析柱,是一种基于分子大小差异进行分离的层析技术核心工具。凝胶过滤柱的应用场景:蛋白质纯化:去除杂蛋白、收集特定分子量范围的组分。示例:Superdex75Increase10/300GL适用于重组标签蛋白的制备纯化。脱盐与缓冲液置换:分离大分子(如蛋白质)与小分子(如盐离子)。常用凝胶:SephadexG-10、G-25。分子量测定:通过标准品绘制分子量标准曲线,测定未知样品的分子量。病毒与疫苗纯化:分离病毒颗粒与细胞碎片,如Supero...
高效封闭液是实验中常用的试剂,主要用于减少非特异性结合,提升实验结果的准确性和信噪比。其使用方法因产品类型和实验体系的不同而有所差异,但通常遵循一套标准化的流程。一、使用前的准备选择合适的封闭液:根据实验类型(如Westernblot、免疫荧光、免疫组化等)和膜的类型(如PVDF膜、NC膜等)选择合适的高效封闭液。常见的封闭液类型包括BSA(牛血清白蛋白)封闭液、脱脂奶粉封闭液、即用型快速封闭液等。即用型快速封闭液因其操作便捷、封闭时间短而越来越受欢迎。准备实验材料:确保转印...
凝胶色谱柱是一种重要的色谱分离工具,广泛应用于分子量分离、生物大分子纯化以及高分子材料分析等领域。它基于凝胶渗透原理,通过柱内填充的多孔凝胶介质,实现对不同分子大小的分离。一、工作原理凝胶色谱柱的分离原理基于“分子筛效应”或称“排阻效应”。当待分离的样品溶液流经填充有多孔凝胶的柱子时,不同分子大小的组分在通过柱床时表现出不同的通行路径和速度。1、大分子:由于分子尺寸较大,无法进入凝胶颗粒的孔隙,只能绕过凝胶颗粒表面,因此其流动路径较短,容易较快通过柱子,较早洗脱。2、中等大小...
OJ-H手性柱核心解析:关键性能参数物理参数填料粒径:5μm(H系列)与10μm(传统型),5μm型号柱效更高、分辨率更优。柱长与内径:提供150mm(快速分析)、250mm(标准分析)及半制备柱(10-50mm内径),支持从微克级到克级制备。pH范围:2.0-7.5,耐受弱酸性至中性条件。温度范围:0-40℃,需避免高温导致填料降解。压力限制:5μm填料:建议操作压力≤5MPa,最高耐压30MPa。10μm填料:建议操作压力≤3MPa,最高耐压10MPa。流动相兼容性正相模...
凝胶色谱柱广泛应用于蛋白质、酶、核酸、多糖等复杂生物大分子的分离纯化及结构表征,是生物化学、生物物理、生物医学等学科中重要的工具。具体应用包括:生物大分子的分离与纯化:蛋白质和多肽:可有效分离不同分子量、等电点和疏水性的蛋白质与多肽。如在蛋白质组学研究中,用于分离复杂的蛋白质混合物,以鉴定和分析特定蛋白质;在生物制药生产中,对重组蛋白、单克隆抗体等进行纯化精制,去除杂质蛋白、多肽等。核酸:适用于分离DNA、RNA及其片段,对于研究核酸的结构、功能、代谢以及基因工程等领域具有重...
选择合适的反相c18色谱柱是液相色谱分析中至关重要的一步,它广泛应用于各种化合物的分离,尤其适用于非极性或低极性化合物的分析。其选择不仅关系到分离效果,还直接影响到分析的准确性、重现性和实验效率。以下是选择合适反相c18色谱柱时需要考虑的几个关键因素。1、柱长与内径柱长和内径是影响色谱分离的两个重要参数。柱长决定了分离的效率,通常柱长越长,分离效果越好,但样品分析时间会相应增加。柱内径则影响样品的加载量和流速,内径越大,样品的加载量越多,但对于高分辨率分离来说,较小内径的柱子...
异构体是指分子式相同,但分子结构不同的化合物。它们具有相同的原子组成和数量,但由于原子在空间中的排列方式或化学键的连接顺序不同,导致其物理性质和化学性质存在差异。异构体主要分为构造异构体和立体异构体两大类。异构体分析的意义:化学研究:异构体的研究有助于深入理解分子的结构和性质之间的关系,为有机化学的理论发展提供重要依据。通过研究异构体的合成、反应机理等,可以揭示化学反应的本质和规律。药物研发:在药物领域,许多药物分子存在对映异构体,不同对映异构体的药效和毒性可能差异很大。因此...
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