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如何区分正相色谱柱和反相色谱柱

发布时间:2015-10-20浏览:2074次

         本质上是填料(固定相)的不同,正相色谱柱填料极性强,洗脱顺序由弱到强;反相色谱柱填料极性弱,洗脱顺序由强到弱。以下是详细说明:

1、正相色谱

    正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)以及其他具有极性官能团胺基团,如(NH2APS)和氰基团(CNCPS)的键合相填料。

    由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他极性基团极性较强,因此,分离的次序是依据样品中各组分的极性大小,即极性较弱的组份先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如正已烷(Hexane),氯仿(Chloroform),二氯甲烷(Methylene Chloride)等。

2、反向色谱

    反向色谱用的填料常是以硅胶为基质,表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反向色谱所使用的流动相极性较强,通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分先被冲洗出,而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。

常用的反向填料有:C18ODS)、C8MOS)、C4Butyl)、C6H5Phenyl)等。

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