c18色谱柱的老化注意事项

　　c18色谱柱出厂时一般都封装有甲醇或乙腈等有机溶剂。随着时间的推移，色谱柱内的有机溶剂缓慢挥发，色谱柱内可能出现气泡。因此，新购买的色谱柱在使用前一般都要进行活化操作。

 

　　c18色谱柱的基质：

 

　　硅胶基质：通用的基质，强度大，化学修饰容易，但使用的pH值范围有限（一般为2—8，特殊修饰的可以达到1—12）。

 

　　聚合物基质：多为聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂，化学稳定，应用pH范围宽，具有更强的疏水性，对蛋白质等样品分离效果较好；但强度较小，有机溶剂可能导致聚合物溶胀而受损，批次重复性较差，商品化色谱柱不多，一般价格较贵。

 

　　载碳量：基质表面键合相的比例，载碳量高，则保留增加，适合分析非极性化合物。

 

　　键合相：键合试剂不同，对化合物的选择性不同，一般长链的烷基键合相（C18、C8）比短链的（C4、C3）稳定；非极性的键合相比极性的键合相（－NH2）稳定。

 

　　老化色谱柱是气相应用的一项常见工作，老化的目的在于去除固定相表面不稳定的固定相流失碎片或污染物，让色谱柱为即将进行的分析做好准备。通常，新柱初次使用、色谱柱放置一段时间后再次使用、或色谱柱受到一定污染或损伤后都需要进行适当的老化。

 

　　老化的注意事项：

 

　　1、老化的温度一般不要超过色谱柱的恒温温度上限，初次老化可以升温至色谱柱zui高使用温度（程序升温温度上限）老化一段时间，建议不超过10min；

 

　　2、对于强极性色谱柱（如聚乙二醇固定相），建议采用较缓的程序升温，如5°C／min。