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使用反相c18色谱柱前要做些什么

更新时间:2022-11-22浏览:506次

  反相c18色谱柱是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据溶质极性(疏水性)的差别进行溶质分离与纯化的洗脱色谱法。使用前,须先用甲醇或乙腈试剂以20倍柱体积低流速冲洗,作用是使固定相能充分润湿、碳链舒展,使色谱柱的性能达到状态。具体操作是,将配制好65%的乙腈/水冲洗后,把色谱柱进口端连接在色谱仪上,出口端放空(不可连上检测器,以免污染了检测器),以0.1ml/min~0.5ml/min的低流速将色谱柱中的清稀溶液吹干,过20分钟后再接上检测器,以1.0ml/min的流速,继续冲洗2~8小时;

 
  产品特点
 
  1.通用柱,经典品牌。
 
  2.质控严格,重现性好。
 
  3.高纯硅胶,性能佳。
 
  4.中低价位,经济实惠。
 
  c18反相液相色谱柱的固定相疏水性较强,在使用过程中尽量不要使用高水相条件,若水相比例过高易引起固定相疏水塌陷,引起柱效迅速下降,甚至造成不可逆的负面影响;由于碳载量高,表现尤为明显,建议使用过程中水相比例不超过90%。
 
  反相介质的商品种类繁多,其中代表性的是以硅胶为载体,通过表面键合非极性分子层制备。通过控制反应时间和温度,可获得性能稳定的反相介质。在硅胶基质的反相填料中,以键合有C18、C8、C2的球形多孔填料为常见。在反相色谱中,采用高溶剂强度、低极性的流动相时可获得较低的保留值。固定相的不同也可以导致选择性发生变化,氰基柱、苯基柱、C8柱、C18柱等的选择性有很大差异,一般应优先考虑C8柱、C18柱,然后是氰基柱,再次是苯基柱。

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