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使用凝胶色谱柱进行分离的过程是什么样的

更新时间:2023-09-08浏览:759次

  凝胶色谱柱也被称为分子筛柱或凝胶过滤柱,是一种常用的色谱柱,用于根据分子大小分离和纯化样品中的生物大分子。它基于溶液中大分子与凝胶颗粒之间相互作用的差异来实现分离。TSK GEL HHR系列装填有粒径为5μm的苯乙烯二乙烯基苯共聚物填料,该类色谱柱又优良的溶剂可置换性和耐用性。TSK GEL G2000HHR高使用温度可到60℃。


  使用凝胶色谱柱进行分离的过程如下:

  样品加载:将待测样品以溶液形式加载到色谱柱上,样品中的生物大分子会进入凝胶颗粒的孔隙中。

  分离过程:在柱中,较大的生物大分子由于体积较大而无法进入凝胶颗粒的内部,从而通过柱床快速流出;而较小的生物大分子会进入凝胶颗粒的孔隙中,因此在柱中停留的时间较长。

  提取纯化:根据分子的大小,通过逐步洗脱柱床,收集到不同分子大小的组分。较大的分子会首先洗脱,而较小的分子则在较后的洗脱过程中被收集。

  凝胶色谱柱的优点包括:

  分子选择性:通过调整凝胶颗粒的孔隙大小和性质,可以选择性地分离目标生物大分子。

  不需高压:相对于其他色谱技术,操作简单,无需高压。

  保持活性:由于色谱柱在分离过程中使用柔软的凝胶材料,因此生物大分子的活性可以被更好地保持。

  凝胶色谱柱的填料是由多孔性凝胶颗粒构成,这些颗粒可以具有不同的孔隙大小和排列方式,以实现对大分子的分离。常用的凝胶材料包括琼脂糖、聚乙二醇、聚丙烯酰胺等。为了获得高质量的分离结果,选择合适的填料材料和柱尺寸非常重要。此外,凝胶柱的操作和储存应遵循生产商提供的说明书或建议,并且对于每次使用前都应进行柱的再平衡和校正。

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