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以下文章来源于技尔上海 ，作者技尔GL Sciences
您是否经历过分析寡核苷酸、蛋白等生物样品时出现吸附拖尾严重，进而导致检测灵敏度低、重现性不好等问题? ProteoSil生物用液相色谱柱[柱」您一臂之力!
随着生物医药行业的高速发展，各个生物药细分领域的质量控制也日趋完善。GL Sciences紧跟行业发展脚步，研发了ProteoSil系列生物用液相色谱柱，可应用于核酸、寡核苷酸、肽段、蛋白、单克隆抗体、疫苗等分析物。
下文将为您详细介绍这款新品，同时也会为大家分享几个应用案例。
一、产品特点
通常含有磷酸基团及金属配位的化合物较易与不锈钢表面的金属离子产生吸附。金属吸附会对峰形、检测灵敏度和重现性产生负面影响，并降低定量分析的性能。
虽然可以通过重复注入高浓度样品来抑制吸附，但这种方法既费时又昂贵。另一种方式是使用含有螯合剂的溶液来抑制吸附，但是此方法不适用于LC-MS分析，因为它可能导致污染和灵敏度降低。所以在做生物分析时建议选择PEEK材质的色谱柱。
ProteoSil系列色谱柱除了有PEEK材质外，其不锈钢(SUS)材质也进行了InertMask惰性化处理技术。这是一种表面失活的功能薄膜处理技术。基于该涂覆技术，在不锈钢管内壁金属部件上进行均匀涂覆，使金属表面覆盖了一层高弹性的玻璃薄膜。因此不锈钢(SUS)材质的色谱柱一定程度上也可以稳定地分析高金属吸附性化合物(如胺类等)。
ProteoSil有常规100 Å，200 Å，300 Å的规格，对填料的硅胶孔径大小进行精确控制，使其满足生物分析的多样化选择。具体而言，如200Å孔径适合于分析分子量范围从几千Da到几万Da的化合物，为多肽和寡核苷酸的分析提供较佳性能。
*填料孔径和适合分析物分子量的范围：
ProteoSil拥有多种固定相可选。常规反相模式有C18,C8,C4，HILIC模式有烷基酰胺基，体积尺寸排阻模式有DIOL固定相可供选择。
ProteoSil拥有不锈钢，PEEK，PEEK内衬不锈钢( 在使用UHPLC时能够增强色谱柱的耐压性)三种材质。
除了官能团化学修饰和封端处理，GL Sciences是自主独立生产合成硅胶填料的厂商之一，生产的色谱柱具有良好的批次重现性。
二、应用案例
案例一：寡核苷酸的分析
分析条件：
色谱柱: ProteoSil 200-C18(3μm, 100x3.0mm I.D.)
流动相:
A) 5mM TEAA in H2O(pH6.5)/CH3CN=80/20,v/v
B) 5mM TEAA in H2O(pH6.5)
A/B=5/95-(60min)-50/50,v/v .
流速: 0.8mL/min
柱温: 40°C
检测器: UV 260nm
样品:
1.CATGACGTTCCTGATGCT(18mer,M.W.5465.61)
2.CCATGACGTTCCTGATGCT(19mer,M.W.5754.79)
3.TCCATGACGTTCCTGATGCT(20mer, M.W.6058.99)
案例二：肽和蛋白质的分析
分析条件：
色谱柱: ProteoSil 300-C18(5μm,150x4.6mm I.D.)
流动相:
A) 0.05% TFA in (CH3CN/H2O=90/10,v/v)
B) 0.05% TFA in H20
A/B =20/80-40min-40/60,v/v
流速: 1.0mL/min
柱温: 30°C
检测器: UV 280nm
进样量: 20μL
样品:
1.催产素0.05mg/mL
2.蛋氨酸脑啡肽0.11mg/mL
3.亮氨酸脑啡肽0.11mg/mL 4.血管紧张素Ⅱ 0.05mg/mL 5.血管紧张素Ⅰ 0.16 mg/mL
6.胰岛素0.05mg/mL
7.胰岛素B链0.10mg/mL
保护柱安装在进样口和分析柱之间，主要用于保护分析柱。有3种不同类型可供选择。
总结：针对生物制药及其他易吸附的金属配位物，建议选择ProteoSil生物用液相色谱进行分析。欢迎各位老师试用！
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