宽PH色谱柱是一款耐溶剂型手性柱,硅胶表面共价键合有直链淀粉-三。具有很好溶剂耐受性,所有适用于HPLC的溶剂均可作为流动相或者样品溶媒使用。因此它可以用于各种分析条件,不必担心因溶剂使用不当而造成的劣化或者损坏。同时也进一步扩大了分离条件的选择范围,能够分离更多的手性化合物。
1.避免过高的柱压
虽然宽PH色谱柱能耐受的压力可达6000psi(磅/平方英寸),但过高及过大的压力变化均会缩短色谱柱的寿命,避免的方法是:
(1)柱压过高时,尽可能采用较小的流速,以不超过柱最大允许压力的一半为宜。
(2)当流速较大时,应采取流速梯度的办法使流速分步到位。
(3)使用手动进样阀时,进样阀的切换要尽可能的快。否则
超过20%的压力冲击会很快使柱报废。当使用多柱联用时,柱切换要避免在高压下进行。
2.注意温度和酸碱度
一般以硅胶为基质的色谱柱最高使用温度不超过60℃,以低于40℃为宜,特别是在流动相pH接近使用限度时,更应降低使用温度。温度过高会加快键合相的水解和硅胶的溶解,从而,使填料性质改变,柱床塌陷,降低柱效,改变峰形。如必须要在特别的pH条件下使用宽PH色谱柱时,可通过以下方法避免柱损害:
(1)在泵和进样阀之间加装预柱(饱和柱)来饱和流动相;
(2)降低使用温度;
(3)检验完毕后立即用与所使用的流动相互相混溶的“温和溶剂”*清洗。