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品牌 | 其他品牌 | 供货周期 | 现货 |
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应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
应用SEC柱G4000SWXl色谱柱 口蹄疫(Foot-and-mouthdisease,FMD)是传染性的家畜疫病之一。目前,我国对口蹄疫采取以灭活疫苗免疫为主的防控策略,使用的灭活疫苗以双相油乳剂疫苗为主,疫苗的质量对于口蹄疫的防控关重要[1-2]。疫苗对动物的保护效果主要取决于两个方面,一是疫苗毒株与流行毒株的相似程度,二是疫苗中抗原的含量[3]。使用体积排阻色谱法(G4000SWxl色谱柱)对灭活的口蹄疫病毒液中的 146S 抗原进行检测,该技术在疫苗生产工艺研究和质量控制中均具有应用前景。
色谱条件
应用SEC柱G4000SWXl色谱柱(7.8 mm×30 cm) 色谱柱 (TOSOH)、TSKgel guard column SWXL(6.0mm×4cm)保护柱(TOSOH);流动相:pH7.2的 50 mmol/L 磷酸缓冲液,含 0.1 mol/L Na2SO4; 紫外检测器检测波长:259 nm;流速:0.6 mL/min。将 146S 纯化样品色谱检测结果作图,经线性回归处理,得到146S的回归方程为:Y=45216X–78 422 (R2=0.996, n=10),结果表明, 146S 在0.56–67.42 µg/mL 范围内呈良好的线性关系,当浓度为 0.56 µg/mL 时,S/N=14.62,满足定量限要求。146S 抗原保留时间在 13–14 min 。
耐受性实验
通过改变流动相pH值和环境温度,考察方法耐受性。TSKgel G4000SWxl色谱柱pH适用范围在2.5-7.5,且应置于4-30°C。维持146S抗原稳定性的适pH值为7.8。调节流动相pH范围在6.9-7.5之间。146S抗原色谱峰保留时间和峰形*,考虑到色谱柱耐受性,选用该流动相未经过调节的pH值7.2-7.4。为防止146S降解,需注意实验室温度不应过高,且仪器样品盘英设定低温进样。
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