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凝胶色谱柱的应用也越来越广泛,使用过后也要对色谱柱进行保养,这样才能使它的使用寿命更长久。凝胶色谱柱应该如何进行清洗和存放呢?1.色谱柱的清洗。为了不使被测物质和杂质停留在色谱柱中,在每次的样品分析工作完成之后,都应及时地清洗色谱柱。首先要用对被测样品洗脱能力强的溶剂来洗脱色谱柱,以分析工作中常用的反相色谱分析法为例,因其先流出的物质是极性大的物质,此时应用纯甲醇或使用异丙纯等极性稍弱的溶剂将吸附在柱内的极性小的物质洗脱下来,洗脱液的用量一般为柱体积的20倍即可。如果流动相是...
色谱柱的使用注意内容:a.使用预柱保护分析柱(硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度)b.大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2-7.5,尽量不超过该色谱柱的pH范围c.避免流动相组成及极性的剧烈变化d.流动相使用前必须经脱气和过滤处理e.如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相,应在实验完毕柱子冲洗干净,并保存于甲醇或乙腈中f.氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性,故使用时要注意,柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂,以避免腐蚀
反相色谱柱的选择:1.柱子的PH值使用范围反相色谱柱优点是固定相稳定,应用广泛,可使用多种溶剂。但硅胶为基质的填料,使用时一定要注意流动相的PH范围。一般的C18柱PH值范围都在2-8,流动相的PH值小于2时,会导致键合相的水解;当PH值大于7时硅胶易溶解;经常使用缓冲液固定相要降解。一旦发生上述情况,色谱柱人口处会塌陷。同样填料各种不同牌号的色谱柱不尽相同。2.填料的端基封尾(或称封口)把填料的残余硅羟基采用封口技术进行端基封尾,可改善对极性化合物的吸附或拖尾;含碳量增高了...
如何正确的使用可以延长液相色谱柱的寿命?1、“保护柱”的使用保护柱是很短的色谱柱,填装和液相色谱柱相同的填料。正确使用”保护柱”,可以起到阻拦一些容易损坏液相色谱柱的物质的作用。从而达到延长柱子寿命的效果。相反,如果使用”保护柱”不当,可能会缩短色谱柱的使用寿命。例如,在保护柱使用过程中,如果污染达到一定程度而没有及时更换,累积的杂物很可能会冲入色谱柱中,反而会造成色谱柱损坏。因此,在使用”保护柱”时,重要的是要知道什幺时候该换保护柱。该换的时候就必须要立即更换。2、选择高品...
C18液相色谱柱使用注意事项1.看清说明书后再使用色谱柱内部保存着什么溶剂一定要看清楚,因此色谱柱的说明书一定要看清楚,当然也包括说明书上建议的维护保养规定,对我们都非常的有用。对于反相柱来说,溶剂基本就是乙腈或甲醇。但正相柱就不同了,因为正相柱除了可以适用正相系统,也可以适用反相系统,因此一定要看清楚,对于你的方法来说是否需要置换色谱柱内部保存溶剂。2.用纯水冲洗色谱柱才能把缓冲液冲洗干净使用强溶剂冲洗色谱柱对内部填料的损伤是大的,尤其是纯水,除非你的色谱柱是耐水的。冲洗色...
反相c18色谱柱是在硅胶上或杂化基质颗粒上键合了C18键合相的色谱填料所装填的色谱柱,按反相色谱条件进行操作和分离。反相是液相色谱中常使用的分离模式,而C18柱是常使用的反相色谱柱之一。反相色谱柱的选择性主要为疏水作用、立体选择性和氢键作用,还有一些二级作用,比如:离子交换、金属螯合作用等。我们来分析下反相c18色谱柱的表征参数:1.疏水作用(Hy):通过相同流动相体系,在不同的反相色谱柱对进行乙基苯测试,考察乙基苯的保留因子,保留因子越大,柱的疏水作用越强。2.立体选择性(...
气相填充柱的保养:气相填充柱在使用前,可进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。在对气相填充柱使用前进行测试以后,要根据不同的情况对色谱柱进行保养:①每天实验后的保养:使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。②长期保存气相填充柱:如气相填充柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下。对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中...
宽PH色谱柱提供四种键合固定相,用于方法开发优化。可在宽pH范围(pH2-9)内提供良好的峰形,用一系列色谱柱可灵活开发其他方法。可提供多种粒径色谱柱,实现高速、高分离度、分析和制备分离。色谱峰宽由两部分构成:一、对称峰宽。二、拖尾峰宽。所谓对称峰宽,就是指这种峰宽不会造成峰型不对称,不会出现拖尾前伸。而拖尾峰宽,就是指这个峰宽构成,会导致峰形状变的不对称。我们首先要研究的是对称峰宽,这个导致了峰宽的主要构成。对称峰宽:对称峰宽主要包括两部分:1、塔板理论正常展宽。2、正常进...
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