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c18色谱柱利用非极性的反相介质为固定相，极性有机溶剂的水溶液为流动相，根据溶质极性（疏水性）的差别进行溶质分离与纯化的洗脱色谱法。在硅胶基质的反相填料中，以键合有C18、C8、C2的球形多孔填料为常见，用途广。通过键合CN键，改变反相介质极性，就变成了正相色谱。c18色谱柱固定相稳定，应用广泛，可使用多种溶剂。但硅胶为基质的填料，使用时一定要注意流动相的PH范围。一般的C18柱PH值范围都在2-8，流动相的PH值小于2时，会导致键合相的水解；当PH值大于7时硅胶易溶解；经常...
反相c18色谱柱是一种常见的色谱柱，用于化学分析和制药领域中的分离和纯化。与其他色谱柱不同，反相色谱柱采用的是非极性的固定相，例如碳链或芳香族化合物。这种非极性固定相可以与非极性或极性化合物发生相互作用，从而实现分离和纯化。反相c18色谱柱的分离原理基于极性差异。在反相色谱柱中，样品分子在流动相中逐渐进入固定相中，其中非极性的样品分子会与固定相发生相互作用，停留时间较长；而极性的样品分子则会较快地通过固定相，停留时间较短。通过调整流动相的成分和温度，可以进一步实现对样品分子的...
大赛璐手性柱是由具有光学活性的单体，固定在硅胶或其它聚合物上制成手性固定相。通过引入手性环境使对映异构体间呈现物理特征的差异，从而达到光学异构体拆分的目的。要实现手性识别，手性化合物分子与手性固定相之间至少存在三种相互作用。这种相互作用包括氢键、偶级-偶级作用、π-π作用、静电作用、疏水作用或空间作用。手性分离效果是多种相互作用共同作用的结果。这些相互作用通过影响包埋复合物的形成，特殊位点与分析物的键合等而改变手性分离结果。由于这种作用力较微弱，因此需要仔细调节、优化流动相和...
GL色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏，选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需的时间，并且使方法更具稳定性。柱越长，总柱效越高（n值越大），柱越长，分析时间也越长。GL色谱柱的柱效率与柱半径平方成反比，内径越小柱效越高，但内径越大，柱容量也增加，允许进样量就越多。当进样量超过柱容量时，则因柱内每块理论板内不能建立平衡，将会导致色谱蜂畸变，柱分辨率降低，重现性不好。因此对于复杂样品需要准确分离，要使用小内径柱子。分析大分子量化合物选择大孔径色谱柱；对于高pH值或者碱性化合物需要...
反相c18色谱柱是指利用非极性的反相介质为固定相，极性有机溶剂的水溶液为流动相，根据溶质极性(疏水性)的差别进行溶质分离与纯化的洗脱色谱法。使用前，须先用甲醇或乙腈试剂以20倍柱体积低流速冲洗，作用是使固定相能充分润湿、碳链舒展，使色谱柱的性能达到状态。具体操作是，将配制好65%的乙腈/水冲洗后，把色谱柱进口端连接在色谱仪上，出口端放空（不可连上检测器，以免污染了检测器），以0.1ml/min~0.5ml/min的低流速将色谱柱中的清稀溶液吹干，过20分钟后再接上检测器，以1...
c18色谱柱键合到硅胶上的烷烃是18个碳，填充的是C18。适合分析弱极性物质里极性更弱的物质。分子量较小的物质，经常用C18来进行分析和分离。C18柱的填料对色谱柱的影响，碳含量即填料中的含碳量。传统的测量技术是将填料加热到碳氢键断裂，然后通过测定损失的重量或形成的二氧化碳来计算碳含量。可以通过增加碳键的长度或增加键合密度来增加碳含量。碳含量增加，柱子的保留值增加。键合相的色谱行为与键合密度有关，也与硅胶的密度及填料的表面积有关，填料的密度越高，填柱所需的硅胶量越多，柱子的含...
异构体分析参照液相色谱法测定。参与构造交互项的各组成部分对被解释变量的影响依赖于交互项中其他部分的取值。蛋白类药物具有的翻译后修饰，如糖基化、N末端的焦谷氨酸化、C末端的赖氨酸截除、氧化、脱酰胺等，这些不同的翻译后修饰组合可使蛋白分子产生无数种电荷异构体。另外，单抗在特定的条件下会发生降解、断裂，形成低分子量的片段。这些异构体对于蛋白药物的稳定性及生物学功能发挥具有重要影响，需要用合适的方法进行分析。交互项和分组回归关系在比较关键变量在两个子群体的不同影响时，个人认为交乘项和...
c18色谱柱出厂时一般都封装有甲醇或乙腈等有机溶剂。随着时间的推移，色谱柱内的有机溶剂缓慢挥发，色谱柱内可能出现气泡。因此，新购买的色谱柱在使用前一般都要进行活化操作。c18色谱柱的基质：硅胶基质：通用的基质，强度大，化学修饰容易，但使用的pH值范围有限（一般为2—8，特殊修饰的可以达到1—12）。聚合物基质：多为聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂，化学稳定，应用pH范围宽，具有更强的疏水性，对蛋白质等样品分离效果较好；但强度较小，有机溶剂可能导致聚合物溶胀而受损，批次重复...
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